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苯异硫氰酸法(PITC)

来源:化工产品网-原创 发布时间:2023-08-12 04:58:20
苯异硫氰酸法(PITC)

苯异硫氰酸法(PITC)是一种常用的蛋白质定量方法,它通过反应蛋白质中的氨基酸和苯异硫氰酸(PITC)形成硫脲,然后使用紫外光谱法测定硫脲的吸收强度来计算蛋白质的浓度。

具体的操作步骤如下:首先将待测蛋白质溶解在缓冲液中,然后加入过量的苯异硫氰酸,使其与蛋白质中的氨基酸反应,形成硫脲。反应完成后,将样品离心沉淀,去除上清液,然后用乙腈洗涤硫脲沉淀,最后将其溶于乙腈中测定其吸收光谱,计算出蛋白质的浓度。

PITC法具有操作简便、灵敏度高、选择性好等优点,适用于各种类型的蛋白质定量,但需要注意的是,PITC和蛋白质的反应时间过长可能会影响测定结果,而且在操作过程中需要避免光照和高温等因素的影响,以确保测定结果的准确性。


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