液体菌种摇瓶制作方法
液体菌种摇瓶制作是一种重要的微生物培养技术,通常用于生产微生物发酵产物和分离菌株等方面。以下是一种常规的液体菌种摇瓶制作方法:
材料准备:
1. 培养基:根据需要选择适当的培养基,如LB培养基、M9培养基等。
2. 摇瓶:选择适量的摇瓶,通常使用容积为250ml或500ml的三角瓶或圆底瓶。
3. 菌种:选择需要培养的菌株。
制作步骤:
1. 准备培养基:按照培养基说明书中的配方,称取适量的培养基粉末,加入适量的去离子水,混合均匀,加入适当的酸或碱调节pH值,然后加入适当量的琼脂(如需要),再次混合均匀。
2. 灭菌:将培养基装入摇瓶中,盖上瓶盖,放入高压灭菌器或自动压力灭菌锅中,进行高压灭菌,通常在121℃下压力为15psi,灭菌时间为15-20分钟。
3. 接种:取出灭菌后的摇瓶,将其放入无菌操作台中,用无菌技术将菌种接种到摇瓶中。
4. 培养:接种完成后,将摇瓶放入恒温振荡培养箱中,进行培养。通常温度为28-37℃,摇瓶的转速为150rpm左右。
5. 储存:培养时间达到所需时间后,将菌种摇瓶放入冰箱或低温冷库中,可长期保存。
总结:
液体菌种摇瓶制作是一种简单、可靠的微生物培养技术,适用于各种微生物的培养和分离。制作液体菌种摇瓶需要注意无菌操作,避免污染,同时需注意摇瓶中液体的液位和培养条件的控制,以保证菌株的正常生长。