瑞氏染色法是一种常用的细胞染色方法,主要用于观察细胞核的形态和数量。下面将介绍瑞氏染色法的操作步骤。
1. 取一片已涂有细胞的载玻片,用甲醇固定细胞。将载玻片放在甲醇中浸泡5-10分钟,使细胞膜破裂并细胞核固定。
2. 将载玻片从甲醇中取出,用蒸馏水冲洗3-5次,以去除甲醇和其他污染物。
3. 将载玻片放在染色液(盐酸-甲苯-瑞氏液)中浸泡5-10分钟,使细胞染色。染色液的配方为:盐酸1ml、甲苯3ml、瑞氏液1滴。
4. 取出载玻片,用蒸馏水冲洗3-5次,以去除多余染料。
5. 将载玻片晾干,倒上一滴透明胶,用玻璃片压平,使细胞固定在载玻片上。
6. 将载玻片放在显微镜下观察,用油镜或100倍以上的高倍镜观察细胞核形态和数量。
需要注意的是,在操作过程中要注意卫生和安全,避免染料进入眼睛或口中。此外,制作瑞氏液时要严格按配方比例配制,避免染料浓度过高或过低,影响染色效果。